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    反相液相色譜法同時測定發(fā)酵乳中的蛋白糖和氨基酸

    更新時間:2015-01-08瀏覽:1779次

     

    ◆ 說明
    蛋白糖(英文名aspartame,又名阿斯巴甜)是由氨基酸組成的二肽類甜味劑。它具有類似蔗糖的甜味,不致齲,不致肥,無任何副作用,是保健食品、飲料等的低卡甜味劑。單純測定蛋白糖或氨基酸的報道已有不少,而對蛋白糖的測定大多局限于對配制軟飲料中單種蛋白糖成分或對食品添加劑如色素、防腐劑等成分的檢測分析方面。考慮到在發(fā)酵乳制品中,氨基酸的種類及含量是常被檢測用于評價其營養(yǎng)性能的重要指標,而蛋白糖在降解過程中也會產生一些氨基酸,為此,我們探討了在測定氨基酸的同時測定蛋白糖含量的可能性。
    ◆ 分析條件
    儀器:STI P5000梯度系統(tǒng)
    色譜柱:Vertex AQ-C18,5μm,150mm×4.6mmI.D.
    檢測器:STI UV5000紫外檢測器
    流動相:流動相A:19.0 g NaAc·3H2O溶于1 L超凈水中,加0.5 mL三乙胺,用冰醋酸調pH至6.40,脫氣。洗脫液B:600 g/L乙腈。稀釋液:710 mg Na2HPO4加超凈水1 L,用100 g/L的V(磷酸)∶V(乙腈) =95∶5調pH值為7.4,過濾備用。
    梯度程序:
    時間(分鐘)   流速(min   流動相A%V   流動相B%V    
    0.5            1.0              90                10
    10.5            1.0              49                51
    16.5            1.0               0               100
    17.0            1.0               0               100
    17.5            1.5               0               100
    18.0            1.5              90                10
    23.0            1.5              90                10
    23.5            1.0              90                10
    柱溫:28℃
    檢測波長:254 nm
    流速:1.0 mL/min
     
    ◆ 譜圖
     
     
     
     
     
     
     
    PTC-氨基酸、PTC-蛋白糖、衍生試劑產物的色譜圖
    Chromatogram of amino acids,aspartame and derivatives
    1.Asp, 2.Glu, 3.Ser, 4.Gly, 5.His, 6.Arg, 7.Thr,8.Ala, 9.Amonia, 10.Pro, 11.Tyr, 12.Val, 13.Met,14.Cys, 15.Ile, 16.Leu, 17.Phe, 18.Lys, 19.aspartame.
    結論
    用上海禾工VERTEX STI 5000梯度液相色譜儀同時測定發(fā)酵乳中的蛋白糖和氨基酸,方便,準確,快速。
     

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